二代和三代最大的区别在于应用的人群不同。

第二代试管婴儿，也叫单精子卵泡浆内显微注射，主要是针对于男方的严重少精、弱精、畸精或者无精子症的患者，它的手术操作是将一条好的精子直接注射到一个成熟的卵子里面进行受精。

第三代试管婴儿主要是采用了第二代相同的受精方式，形成胚胎以后在移植到子宫之前将胚胎进行筛选，这个过程也叫胚胎植入前遗传学诊断，这个技术主要应用于夫妇有单基因疾病，比如地中海贫血或者夫妇染色体异常，或者反复种植失败的患者。